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PCR仪的分类有这些
发布时间:2020-03-18   点击次数:7次
   PCR仪的分类有这些
  PCR仪主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。为了让大家更好地了解PCR仪,下面我们来说说其分类及其作用。
  1.梯度PCR仪
  仪器多应用于科研、教学机构。
  一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNApian段其较适合的退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的较适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约经费。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。
  2.实时荧光定量PCR仪
  在普通PCR仪设计基础上增加荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量PCR功能的仪器。其PCR扩增原理和普通PCR扩增原理相同,在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。
  荧光定量PCR仪有单通道,双通道和多通道之分。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,实现一次检测多种目的基因的功能。
  实时荧光定量PCR仪主要应用于临床医学检测、生物医药研发、食品行业、科研院校等。
  3.原位PCR仪
  (有些品牌的PCR仪具有普通PCR、梯度PCR、原位PCR的功能,通过替换模块进行多用途开展实验工作)
  是用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪。如病原基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。可保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在的位置进行基因扩增。不但可以检测到靶DNA,还能标出靶序列在细胞内的位置。于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有着重大的实用价值。
  PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。利用升温使DNA变性,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制的目的。
  使用的PCR仪能在模块之间准确到达设定的温度并具有一致性十分关键。确保热准确性的一种方法就是经常使用温度验证试剂盒进行检测并根据需要由接受过培训的专业人士进行重新校准。温度验证检测通常可用于:
  在等温模式下相对于设定温度的孔间准确性
  在温度转换后相对于设定温度的孔间准确性
  热盖温度的准确性(可影响模块和样品温度)
  以上关于PCR仪的介绍就到这里了,希望对你有所帮助。

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